균류(fungi)는 자연계에서 널리 발견됩니다. 현재까지 약 400,000종의 종이 알려져 있지만, 그 중 100~150종만이 인간에게 감염을 일으킬 수 있습니다. 곰팡이로 인한 질병을 진균증이라고 합니다. 곰팡이와 곰팡이 질병을 연구하는 과학 분야를 균학이라고 합니다.
진균은 진핵 구조를 가진 미생물입니다. 엽록소가 없기 때문에 광합성을 할 수 없으며 이러한 특징이 식물과 다릅니다. 이들은 조건성 혐기성 생물 또는 절대 호기성 생물입니다. 곰팡이는 이종친화성 미생물입니다. 즉, 유기 화합물을 탄소 및 에너지원으로 사용합니다. 가수분해 효소를 외부 환경으로 방출하여 음식물을 소화하고, 소화된 영양분을 흡수하여 세포 내로 가져갑니다.
일부 버섯에는 캡슐이 있고 다당류 구조를 가지고 있습니다. 캡슐 다당류는 glucuronoxylomannan, galactoxylomannan 및 manno단백질의 세 가지 이상의 폴리머로 구성됩니다. 곰팡이에서는 세포벽의 90%가 키틴, 글루칸, 만난, 키토산과 같은 다당류 중합체로 구성되어 있고, 10%는 단백질, 당단백질 및 지질로 구성되어 있습니다. 다당류의 종류와 양은 버섯 종류에 따라 다릅니다. 세포벽은 세포에 모양을 부여하고, 삼투압 충격으로부터 세포를 보호하며, 항원성을 갖고 일부 효소를 함유하고 있기 때문에 생리적 활동을 합니다. 세포막은 포유류의 막과 유사하게 인지질, 단백질, 스테롤로 구성된 이중층 구조입니다. 포유류의 막과 달리 콜레스테롤 대신 에르고스테롤과 자이모스테롤이 함유되어 있습니다. 세포막의 기능에는 세포질 보호, 물질 교환 조절, 캡슐과 벽 합성 지원 등이 포함됩니다. 오늘날 치료 목적으로 사용되는 대부분의 항진균제의 표적 부위는 막에 위치한 에르고스테롤입니다.
진균 포자는 번식을 담당합니다. 번식은 유성 포자(접합포자, 자낭포자, 담자포자), 무성 포자(포자포자, 절절포자, 클라미도포자, 거대 분생포자, 미세 분생포자, 포자낭포자)를 통해 또는 반성생식으로 발생합니다. 곰팡이의 과학적 분류는 유성 포자를 기반으로 합니다. 형태학적 외관에 따라; 효모균(칸디다, 사카로미세스 등)과 곰팡이균(자낭균류, 접합균류, Deuteromycetes 등)의 2가지로 나누어집니다.
진단 테스트
배양 기반 및 비배양 기반(혈청학적, 분자적) 방법을 적용하여 다양한 곰팡이의 분리 및 동정을 수행합니다. 항진균제 치료를 시작하기 전, 임상 검체는 포르말린에 담그지 않고 무균 조건에서 채취한 후, 해당 물질에 가장 적합한 담체를 담은 멸균 용기에 담아 실험실로 전달해야 합니다.
배양 결과를 얻으려면 직접적인 현미경 평가가 매우 중요합니다. 실험실로 보내진 임상 시료는 먼저 육안으로 평가되며, 현미경 평가를 통해 효모나 곰팡이의 존재 여부에 대한 초기 정보를 얻습니다. 직접 현미경 검사에서 KOH는 10-20-30%, 일반적으로 30%의 비율로 사용됩니다. 피부 및 손톱 긁힌 부분, 깃털, 머리카락, 양모, 피부 조각 등 KOH를 수집된 물질에 첨가하여 키틴층을 용해시키고 곰팡이 균사를 드러냅니다. 염색현미경검사에는 그람염색, 락토페놀코튼블루, 칼코플루어화이트, 인도잉크, Grocott-Gomori matamine silvering, pyrodic acid-Schiff(PAS), Giemsa, Wright, Mason-Fontana 등의 염료가 사용된다. 목재의 빛은 감염된 표면의 곰팡이를 검색하는 데에도 사용될 수 있습니다. 산화니켈 필터를 통과한 자외선 A선입니다. 이 빛 아래에서는 옅은 노란색, 녹색, 노란색 형광, 산호색 형광 등의 색상을 나타내어 일부 곰팡이를 식별할 수 있습니다.
배양은 직접 진단 방법보다 더 구체적인 진단 방법입니다. 현미경 사용. 확정적인 진단이 불가능하거나 곰팡이의 종류를 판별하기 위해 적용됩니다. 배양 평가에서는 콜로니의 형태와 그에 따른 색소 색상이 우선적으로 고려됩니다. 사용되는 배지는 채취한 임상 샘플에 따라 다릅니다. 배양 배지는 1차 분리 목적과 특정 목적으로 구분됩니다.
1차 분리 목적,
- Sabauraud-dextrose-agar(SDA) 및 Brain heart infusion 한천(BHI); 부생성 및 병원성 진균의 일차 분리에 사용됩니다. 비멸균 환경에서 채취한 샘플의 경우 항생제가 함유된 SDA 및 BHI를 사용합니다. 실온 및 37°C에서 1~4주 내에 번식하며 일반적으로 황백색 또는 크림색을 띠고 부드러운 질감을 가지며 일반적으로 효모가 있고 냄새가 나는 군집을 형성합니다.
-억제 곰팡이 한천 및 효모추출물 인. 말 한천; 병원성 진균의 일차 분리.
특정 목적:
-Tween 80 및 트리판 블루(MUJ)가 함유된 옥수수 가루 젤리; Candida albicans의 Chlamydospore 진단,
-목화 종자 형질전환 한천; Blastomyces dermatitidis의 곰팡이 단계에서 효모 단계로의 변형,
-Czapek's agar; Aspergillus 분리,
새 종자 한천(Staib agar); 크립토코쿠스 네오포르마스 분리,
-CHROMagar Candida; 효소 반응 형성을 기반으로 한 칸디다 종의 분리
-효모 발효액; 효모의 발효특성,
-효모질소한천; 효모의 탄수화물 동화 특성.
또한 BACTEC 및 BacT/Alert 방법은 혈액 배양에서 곰팡이 검출을 가속화합니다.
세균-튜브 테스트; 이 테스트에서는 세포의 배아관 형성을 모색합니다. 효모 유사 미생물의 가벼운 현탁액을 0.5~1.0ml의 멸균 혈청에 넣고 37°C에서 2~4시간 동안 배양합니다. 혼합물 한 방울을 슬라이드 위에 놓고 커버슬립으로 덮습니다. 세포로부터 배아관이 형성되었는지 여부를 현미경으로 조사합니다. 이러한 상황은 C. albicans의 특징입니다.
혈청이나 체액에서 진균 항원이나 대사산물을 검출하는 검사는 전신 진균 감염의 혈청학적 진단에 더 가치가 있습니다. 항체는 라텍스 응집(LA), ELISA, 효소 면역 분석(EIA), 방사면역 분석(RIA), 면역전기영동(IE) 및 면역확산(ID) 방법으로 검출할 수 있습니다. 이러한 방법을 사용하면 세포 구조 또는 대사산물의 항원; 만난, D-아라비니톨, (1-3)-β-글루칸, 다당류인 글루코록시로만난, 갈락토만난 및 에놀라아제를 검출할 수 있습니다.
분자진단 방법이 점차 대중화되고 있지만 모든 임상에서 일상적인 방법으로 적용되고 있습니다. 실험실은 경제적인 이유로 인해 표준화가 부족하여 일반적이지 않습니다. 감염성 진균을 검출하고 식별하기 위해 핵산 증폭 및 혼성화 프로브를 사용한 신호 증폭 방법이 사용됩니다. 핵산 증폭 기술은 중합효소연쇄반응(PCR) 또는 유사한 방법을 사용합니다. 곰팡이 부하량은 매우 낮으며 배양 및 혈청학적 진단은 아직 가능하지 않습니다. 부족한 단계에서는 PCR 기반의 진단 방법이 훨씬 더 효과적이라고 할 수 있습니다. 역전사효소(RT) PCR은 표적 RNA를 증폭시키는 것을 목표로 합니다.
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